DTT二硫蘇糖醇還原性
DTT是一種很強的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態六元環(含二硫鍵)的構象穩定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。
DTT 二硫蘇糖醇特點
由于容易被空氣氧化,因此DTT的穩定性較差;但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。由于質子化的硫的親核性較低,隨著pH值的降低,DTT的有效還原性也隨之降低;而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl(TCEP鹽酸鹽)可以作為低pH值條件下DTT的替代品,而且也比DTT更為穩定。
1mol/L二硫蘇糖醇(DTT)溶液
【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進行高壓處理。
DTT 二硫蘇糖醇 應用
DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體,特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯反應實驗(如DNA在生物感應器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反應一段時間后除去,就可以降低DNA的二聚化。
DTT 二硫蘇糖醇DTT也常常被用于蛋白質中二硫鍵的還原,可用于阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。但DTT往往無法還原包埋于蛋白質結構內部(溶劑不可及)的二硫鍵,這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質變性(高溫加熱或加入變性劑,如6M鹽酸胍、8M尿素或1%SDS)。反之,根據DTT存在情況下,二硫鍵還原速度的不同,可以判斷其包埋程度的深淺。
DTT 二硫蘇糖醇參數
中文名 二硫蘇糖醇
英文名 DL-Dithiothreitol
別 稱 DTT
化學式 C4H10O2S2
分子量 154.25
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名為二硫蘇糖醇。
常用還原劑,有抗氧化作用,進口分裝。DTT和巰基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時,兩者效果相近,但DTT價格略高一些。